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外科學教學精品課程 第二十章 分子生物學在外科中的應用(3)

時間:2009-12-03 15:47來源:外科主治醫師考試 作者:lengke 點擊:
  
四、分子生物學與其他外科疾病
(一)外科重癥疾病
感染性休克是多種細菌感染造成微循環障礙,組織器官有效循環血量不足,導致組織損傷和多器官功能障礙,可并發于多種外科感染性疾病如急性化膿性膽管炎等。近來研究認為,其主要發病機制為細菌內毒素與細胞膜上受體結合,導致核轉錄因子NF-κB的活化以上調多種炎性細胞因子的表達,其中TNF-α為重要的啟動因子。給予基因工程技術獲得的抗人TNF-α單克隆抗體和抑炎因子如重組人IL-10等,對炎性細胞因子瀑布樣級聯反應造成的多器官功能損傷有著明顯的改善作用。重癥急性胰腺炎時多器官功能損害的分子機制亦與感染性休克極為類似,因而在SAP早期給予抗TNF-α抗體或重組人IL-10有可能減輕急性反應期多器官功能的損害,目前在動物實驗研究中已有肯定的結果。
(二)創傷的修復
目前研究較多的有創傷時神經組織的修復及表皮組織的修復。人體脊髓損傷軸突的再生能力較弱,因而脊髓損傷后的恢復治療極為困難。在脊髓損傷的動物模型證實,轉染神經營養因子-3(neurotrophic factor, NT-3)可促進損傷的神經元軸突的再生和重建。此外,在創傷局部使用重組表皮生長因子(epidermal growth factor,EGF)或轉染EGF基因可促進久治不愈創面的修復。
第四節 分子生物學在外科應用中的問題及展望
分子生物學理論和技術的發展以及人類基因組計劃(human genome project,HGP)的即將完成,給外科學的發展帶來了新的機遇和挑戰,臨床醫生對外科疾病的發生和發展有了更為深入的認識,在基因水平進行操作對疾病進行診斷和治療已不再是遙遠的夢想。但必須注意到,大多數分子生物學診斷和治療手段還局限于動物實驗和實驗室,還未能真正應用于臨床。大多數腫瘤還缺乏更為特異的基因或免疫標志物,應對特異性基因標志物和免疫標志物的聯合檢測進行研究,使腫瘤診斷的敏感性和特異性進一步提高。同時不斷改進和發展新的分子生物學檢測技術如利用蛋白二維電泳、蛋白質譜、基因芯片、蛋白芯片、流式細胞術(flow cytometry, FCM)和共聚焦顯微鏡(confocal microscopy)分別對腫瘤細胞的核酸或蛋白進行定量和定性分析等。
如何將目的基因導入細胞是對外科疾病進行基因治療的關鍵一步,盡管可供選擇的基因轉染方法有很多,但它們都不同程度的存在局限性。大多數物理和化學方法和腺病毒載體可以將目的基因導入細胞,但不能穩定的使基因整合到宿主細胞的基因組中,因而這些轉移方式只能產生暫時的高水平基因轉移。逆轉錄病毒載體能將目的基因穩定的整合到宿主細胞的基因組,使宿主細胞和其子代細胞持續含有轉入基因的拷貝,但其插入位點具有隨機性有可能造成宿主細胞原癌基因的激活。要將基因治療簡便有效地用于臨床,需要發展有效的體內基因轉移方法,直接將治療基因導入特異的組織、器官,并限制在某種特異的靶細胞中表達,最理想的狀態是在特定細胞中在正確的時機以適當的水平穩定表達,以參與細胞發育分化的精密調控過程。
隨著人類基因組計劃的迅速進展,積累了大量未知功能信息的序列,目前已提出了P轉座子基因插斷法、mRNA表達差異分析法(如基因表達的系統分析和cDNA微排列等)以及蛋白組研究來進行基因組后研究。上述計劃的實施,將使人類全方位地理解基因的功能,為基因治療開辟了新的思路,使科學家可以通過不同途經進行基因干預,從而根治疾病。相信在不久的將來,外科醫生可以應用手中的“分子刀”來治療疾病,使分子外科成為外科學中一個重要的分支。

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