第五章 臨床生化診斷試劑盒的選擇與評(píng)價(jià)

第一節(jié) 重點(diǎn)解析

一、試劑盒的分類和特點(diǎn)

商品試劑與標(biāo)準(zhǔn)液按檢測(cè)項(xiàng)目組合成一套放在一個(gè)包裝盒內(nèi)叫試劑盒，或叫試劑組合。

1.液體型試劑

(1)液體單試劑 所謂液體單試劑就是將某種生化檢驗(yàn)項(xiàng)目所用到的試劑科學(xué)地混合在一起，組成為一種試劑。應(yīng)用時(shí)，只須將標(biāo)本和試劑按一定比例混合，即可進(jìn)行相應(yīng)的生化反應(yīng)，然后用適當(dāng)?shù)姆椒�檢測(cè)結(jié)果。應(yīng)用十分方便。

(2)液體雙試劑 所謂液體雙試劑就是將某些生化檢測(cè)項(xiàng)目所用到的試劑，按用途科學(xué)地分成兩類，分別配成兩種試劑，通常第一試劑加入后可起到全部或部分消除某些內(nèi)源性干擾的作用，第二試劑為啟動(dòng)被檢測(cè)物質(zhì)反應(yīng)的試劑，兩種試劑混合后才共同完成被檢項(xiàng)目的生化反應(yīng)。然后用適當(dāng)?shù)姆椒�檢測(cè)結(jié)果。

2.粉(片)劑型試劑

所謂粉劑型及片劑型試劑，即是將試劑的各組分用球磨技術(shù)粉碎成粉劑或混合后壓成片劑，使用前再加入指定的溶液復(fù)溶成液體試劑。

干粉試劑如果用固體原料研磨后制成粉劑或片劑，則存在許多問題：①要使試劑各組分混合得非常均勻，技術(shù)難度很大;②分裝過程中的稱量誤差及復(fù)溶時(shí)加水量的準(zhǔn)確性影響試劑的瓶間差;③水質(zhì)優(yōu)劣對(duì)試劑的穩(wěn)定性和測(cè)定的可靠性有相當(dāng)大的影響。

3.其它類型試劑

(1)快速反應(yīng)試劑盒 主要是加大效應(yīng)酶用量縮短反應(yīng)時(shí)間，提高工作效率,是一種發(fā)展趨勢(shì)。

(2)一步法試劑盒 這是利用特異性抗體參與反應(yīng)的新型試劑。

(3)多項(xiàng)同測(cè)組合試劑盒 這類型試劑主要是用于三點(diǎn)雙項(xiàng)同測(cè)終點(diǎn)法、三點(diǎn)雙項(xiàng)同測(cè)連續(xù)監(jiān)測(cè)法和三點(diǎn)雙項(xiàng)同測(cè)終點(diǎn)速率法測(cè)定的試劑盒。方法是在同一比色杯中，先后加入兩種試劑與檢品中的兩種被檢物發(fā)生反應(yīng)，在各反應(yīng)達(dá)到平衡期時(shí)分別測(cè)定，整個(gè)測(cè)定過程進(jìn)行三次比色，測(cè)定兩個(gè)項(xiàng)目，稱為三點(diǎn)雙項(xiàng)同測(cè)終點(diǎn)法。

(4)卡式試劑盒 試劑首先裝入試劑瓶，瓶上充分使用編碼技術(shù)，而后根據(jù)編碼啟動(dòng)調(diào)配、使用及更換儲(chǔ)存。其特點(diǎn)是：①卡式試劑瓶上條碼令使用者可快捷準(zhǔn)確地輸入試劑數(shù)據(jù)，如測(cè)試數(shù)量、批號(hào)、有效期，保證正確識(shí)別試劑。②試劑裝載后能自動(dòng)調(diào)配，可消除潛在誤差，并節(jié)省操作時(shí)間。③持續(xù)不斷地監(jiān)察儀器上已裝載的試劑存量，并在供應(yīng)量不足時(shí)通知使用者。試劑裝載使用時(shí)間可長(zhǎng)達(dá)一個(gè)月。④所有卡式試劑盒大小劃一，有利儲(chǔ)存�？ㄊ皆噭┰O(shè)計(jì)較獨(dú)特，可防止試劑蒸發(fā)及降解，能確保試劑裝載后的穩(wěn)定性更長(zhǎng)，從而節(jié)省成本。⑤標(biāo)簽根據(jù)測(cè)試類別以顏色編碼，便于使用者識(shí)別。

(5)濃縮試劑盒 上述卡式試劑盒就是采用的濃縮試劑，使用時(shí)自動(dòng)完成稀釋，而后用于測(cè)定。濃縮試劑便于工作、儲(chǔ)存、運(yùn)輸、裝載等優(yōu)越性是很明顯的，濃縮試劑便于監(jiān)控、減少校正次數(shù)、提高工作質(zhì)量。

二、液體雙試劑盒的特點(diǎn)

液體雙試劑與其它類型試劑比較具有液體試劑和雙試劑的優(yōu)點(diǎn)。

1.提高了抗干擾反應(yīng)的能力 在臨床生化測(cè)定過程中，血標(biāo)本除了含有待測(cè)物質(zhì)外，還含有各種酶、有機(jī)物、無(wú)機(jī)鹽等物質(zhì)，這些物質(zhì)都會(huì)干擾或參與測(cè)試反應(yīng)，引起非特異性反應(yīng)干擾，而雙試劑型試劑盒設(shè)計(jì)的一個(gè)主要目的就是為了克服這種干擾反應(yīng)。在測(cè)定過程中，首先讓試劑Ⅰ與標(biāo)本中的干擾物質(zhì)反應(yīng)，反應(yīng)5分鐘后，再用試劑Ⅱ啟動(dòng)真正的測(cè)試反應(yīng)，從而使測(cè)定結(jié)果更加準(zhǔn)確。

2.使測(cè)定更科學(xué)合理 由于液體雙試劑的使用，使測(cè)定更加科學(xué)合理。

3.穩(wěn)定性能優(yōu)良 全液體酶法試劑從分配上解決了干粉、片劑型復(fù)溶后穩(wěn)定性的影響：①用戶可根據(jù)每次標(biāo)本量多少按一定比例配制適量工作液，當(dāng)天配制當(dāng)天用完，這樣便可減少試劑損失。②如果用戶使用的自動(dòng)生化分析儀有雙試劑測(cè)定功能，那么，就不必把雙試劑混合成工作試劑進(jìn)行測(cè)定，試劑的有效期一年便是工作液的有效期。

對(duì)于干粉、片劑型等需復(fù)溶的生化試劑，水質(zhì)的好與壞直接影響了復(fù)溶后工作液的穩(wěn)定性和測(cè)定重復(fù)性。如①水中F會(huì)引起某些酶失活;②水中的重金屬離子會(huì)影響酶活力;③水中某些微生物會(huì)引起酶失活，除了水中某?quot;雜質(zhì)"會(huì)引起試劑中酶失活、部分失活而導(dǎo)致穩(wěn)定性、重復(fù)性下降外，有些"雜質(zhì)"會(huì)直接影響測(cè)定結(jié)查，如水中含有NH4便會(huì)直接影響尿素氮測(cè)定的準(zhǔn)確度。

4.試劑組分高度均一 試劑中每一組分均一性是影響試劑測(cè)定重復(fù)性的一個(gè)重要因素。在干粉、片劑與凍干生化試劑生產(chǎn)過程要使每一試劑中十幾種組分(有的組分含量相當(dāng)微量)分布相對(duì)均勻也是一個(gè)技術(shù)難度較高的課題。在每一種試劑生產(chǎn)過程中必須解決：①原料干粉生產(chǎn)過程中每一組分的均勻性(凍干生化試劑在凍干分裝前由于是液體的，每個(gè)組分是相當(dāng)均勻)。②在分裝過程中由于加樣誤差引起的均勻性問題。③在使用過程中，由于需加入復(fù)溶水，復(fù)溶水的加樣誤差也會(huì)造成瓶與瓶之間同一組分濃度不盡一樣。

三、臨床生化診斷試劑的制備

1.標(biāo)準(zhǔn)品的制備

(1)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)應(yīng)具備的條件 必備的主要條件∶ ①純度高;②定值準(zhǔn)確可靠;③穩(wěn)定性好，在保管、使用有效期內(nèi)其示值誤差不超出證書的許可范圍;④均一性好，任何一份分裝的小樣品都具備整個(gè)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的特性指標(biāo)。附加條件∶ ①摩爾質(zhì)量盡可能大;②具有符合使用目的之反應(yīng)特性;③制造簡(jiǎn)便，價(jià)格低廉，購(gòu)買方便;④標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的組成若發(fā)生變化(如吸潮)時(shí)，可采用重新干燥(恒重)等措施使其復(fù)原。

(2)標(biāo)準(zhǔn)液的配制 標(biāo)準(zhǔn)液配制的依據(jù)∶ 供臨床生化常規(guī)測(cè)定用的標(biāo)準(zhǔn)液屬于二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，其示值的準(zhǔn)確性對(duì)檢驗(yàn)質(zhì)量有重大影響，必須在標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)選擇、恒重方法程序、基質(zhì)(包括水)的質(zhì)量、最優(yōu)化的配方和制備工藝上都要嚴(yán)格按照我國(guó)衛(wèi)生部醫(yī)政司主持編寫修訂的《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》(1997年5月，第二版)的要求進(jìn)行。標(biāo)準(zhǔn)液的質(zhì)量鑒定∶ 不論是實(shí)驗(yàn)室自行配制或廠家生產(chǎn)的標(biāo)準(zhǔn)液，都需要認(rèn)真地按照國(guó)家衛(wèi)生部的規(guī)定做好質(zhì)量檢定。提出的規(guī)范化的要求和質(zhì)量檢定標(biāo)準(zhǔn)，并在標(biāo)準(zhǔn)液制備過程中應(yīng)該嚴(yán)格檢定程序，使其達(dá)到質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

(3)標(biāo)準(zhǔn)液的正確使用 ①應(yīng)采購(gòu)診斷試劑正規(guī)生產(chǎn)廠家生產(chǎn)的商品標(biāo)準(zhǔn)液，尤其有國(guó)家衛(wèi)生部生產(chǎn)文號(hào)的產(chǎn)品。②一瓶標(biāo)準(zhǔn)液只能使用一次，避免反復(fù)凍融、反復(fù)使用，尤其是標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)穩(wěn)定性較差的標(biāo)準(zhǔn)液(如尿素、葡萄糖、膽紅素、白蛋白等)以及標(biāo)準(zhǔn)液的基質(zhì)易揮發(fā)的標(biāo)準(zhǔn)液(如用無(wú)水乙醇配制的膽固醇標(biāo)準(zhǔn)液等)更應(yīng)注意。③定值質(zhì)控血清只能用于臨床生化室內(nèi)質(zhì)量控制及室間質(zhì)量評(píng)價(jià)，不能用作常規(guī)分析的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，也不能用于相應(yīng)物質(zhì)含量的標(biāo)化或儀器分析性能準(zhǔn)確性的評(píng)價(jià)。④按照各種標(biāo)準(zhǔn)液不同保存條件妥善保管，并在其有效期內(nèi)使用。

2.試劑中常用工具酶的質(zhì)量保證

工具酶是指作為診斷試劑來(lái)測(cè)定化合物濃度或酶活性的一類酶。它是酶試劑

的核心，它的質(zhì)量是酶試劑質(zhì)量的決定性因素。酶試劑方法已成為最有發(fā)展前途的分析方法。

臨床生化酶試劑中的工具酶主要來(lái)自動(dòng)植物組織提取及微生物發(fā)酵工程。微生物發(fā)酵工程包括高產(chǎn)酶菌種的篩選、放大培養(yǎng)和酶提取純化三個(gè)部分。

為了更有效地發(fā)揮工具酶的催化效能，形成最佳的酶試劑配方，必須確切地掌握該酶對(duì)底物的專一性、分子量、等電點(diǎn)、Km、最適pH、最適溫度等理化特性參數(shù)，并熟悉輔助因子、激活劑和抑制劑對(duì)酶活性的影響。

工具酶的純度一般用酶的比活性和雜酶含量來(lái)表示。 酶的比活性是評(píng)價(jià)酶純度的最好標(biāo)準(zhǔn)，即每毫克(酶)蛋白所具有的酶活性(U/mg)。酶的比活性越高，酶的純度越高。為了兼顧工具酶的較低生產(chǎn)成本和保證酶試劑質(zhì)量，對(duì)工具酶中容易引起副反應(yīng)的其他酶(即所謂雜酶)含量提出了"允許限度"的要求。

3.緩沖液的配制

緩沖液是臨床生化診斷試劑的重要組成部分。緩沖液維持pH恒定的效力取決于其緩沖容量的大小。緩沖容量是指使1L溶液的pH改變個(gè)1pH單位所需要的酸或堿量(mol)。緩沖容量決定于鹽與酸(或堿)的真實(shí)濃度及兩者的比值。緩沖液的濃度越高，緩沖容量越大。一般的緩沖液總濃度在0.05～0.2mol/L之間。當(dāng)總濃度固定時(shí)，鹽與酸(或堿)的比值為1時(shí)，其緩沖容量最大;如果兩者比值相差10倍以上時(shí)，則緩沖容量將大為減小。在實(shí)際工作中，不能無(wú)限制地加大緩沖液的濃度來(lái)增加其緩沖容量，因?yàn)辂}類濃度過高將抑制酶的活性，對(duì)電泳分離也有不利的影響。

配制緩沖液注意的事項(xiàng)為 ①所有試劑最好選用分析純或優(yōu)級(jí)純，并必須恒重后方能配制。②所用儀器必須清潔，容量?jī)x器最好經(jīng)過校正，以保證準(zhǔn)確。③配好的緩沖液必須用酸度計(jì)校正其pH值(準(zhǔn)確至小數(shù)點(diǎn)后兩位)。如對(duì)其濃度有懷疑時(shí)，則應(yīng)用滴定法檢查其濃度。

四、臨床生化診斷試劑盒的選擇

(一)試劑盒的性能指標(biāo)

1.準(zhǔn)確度 通常以回收率、定值血清的靶值范圍、對(duì)照試驗(yàn)及干擾試驗(yàn)的結(jié)果來(lái)判斷。

(1)回收試驗(yàn) 回收率越接近100%，準(zhǔn)確率越高，一般以100%±5%為合格。

(2)定值血清的測(cè)定 對(duì)于某些無(wú)法準(zhǔn)確加入標(biāo)準(zhǔn)物的試劑盒，可用低、中、高濃度的定值血清進(jìn)行測(cè)定，測(cè)得值符合定值血清的靶值范圍( ±2S)為合格。

(3)對(duì)照試驗(yàn) 將被檢試劑盒與公認(rèn)的參考方法同時(shí)測(cè)定若干樣本(一般要求100份，最少需30份)，計(jì)算兩組結(jié)果的相關(guān)系數(shù)和直線回歸方程。相關(guān)系數(shù)γ越接近1.0、斜率b越接近1.0，截距a越接近0，則準(zhǔn)確度越高。相關(guān)系數(shù)要求在0.9～1.0之間，γ值符合要求不等于準(zhǔn)確度都符合要求。b表示比例偏差，a表示恒定偏差。(1-b)×100%表示比例偏差的大小。(a值/樣品含量)×100%表示恒定偏差的大小。

(4)非特異性與干擾試驗(yàn) 對(duì)維生素C、黃疸、溶血、乳糜等因素的耐受程度，干擾值越小越好。

2.精密度 試劑的瓶間差異、批內(nèi)精密度和批間差異三組測(cè)定的平均值之間應(yīng)無(wú)顯著差異，否則，試劑盒的均一性不符合要求。

(1)瓶間差異 同一試劑盒，取10瓶試劑復(fù)溶，測(cè)定同一樣品的含量，求平均值、標(biāo)準(zhǔn)差、變異系數(shù)。

(2)批內(nèi)精密度 同一樣品用同一瓶試劑測(cè)定10次，求平均值、標(biāo)準(zhǔn)差、變異系數(shù)。

(3)批間差異 同一樣品，用不同批號(hào)的10瓶試劑測(cè)定，求平均值、標(biāo)準(zhǔn)差、變異系數(shù)。

3.線性范圍 指該試劑盒按其說(shuō)明使用時(shí)可準(zhǔn)確測(cè)量的范圍。被檢樣品的含量超出測(cè)定線性范圍，必須改變樣品與試劑體積的比例，重新測(cè)定才能得到準(zhǔn)確結(jié)果。試劑盒的測(cè)定線性范圍是衡量試劑盒質(zhì)量的一個(gè)指標(biāo)，也是正確使用該試劑盒的關(guān)鍵之一。試劑盒測(cè)定線性范圍要求能覆蓋該項(xiàng)測(cè)定的常見醫(yī)學(xué)決定水平。

4.抗干擾作用 雙試劑型試劑盒主要優(yōu)點(diǎn)是抗干擾作用。如ALT雙試劑盒的第一試劑能排除內(nèi)源性丙酮酸干擾。此種試劑盒的第一試劑加入被檢血清后，37℃5分鐘內(nèi)顯示NADH被消耗、340nm吸光度值下降的曲線，當(dāng)內(nèi)源性丙酮酸被消耗完，吸光度曲線平坦，加入第二試劑后，340nm吸光度立即上升，當(dāng)ALT酶促反應(yīng)發(fā)生后又下降。這種反應(yīng)曲線顯示了ALT雙試劑具抗干擾作用。甘油三脂測(cè)定雙試劑的排除游離甘油的作用，可加入甘油標(biāo)準(zhǔn)液后進(jìn)行試驗(yàn)，以證實(shí)排除游離甘油的能力。

5.靈敏度 在終點(diǎn)法靈敏度以特定波長(zhǎng)下1cm光徑時(shí)單位濃度的吸光度值表示，如膽固醇酶法測(cè)定試劑盒要求其靈敏度A500nm0.005時(shí)的膽固醇濃度相當(dāng)于0.08mmol/L。連續(xù)監(jiān)測(cè)法以特定波長(zhǎng)下1cm光徑單位酶活性的吸光度值表示，試劑盒質(zhì)量合格時(shí)，其靈敏度值與理論計(jì)算的ΔA/min×因數(shù)值一致。試劑盒的質(zhì)量與靈敏度密切相關(guān)，靈敏度達(dá)不到要求的試劑盒不宜使用。

6.穩(wěn)定性 試劑盒穩(wěn)定性是指試劑盒在規(guī)定條件下儲(chǔ)存仍保持其性能指標(biāo)的期限。

(1)原包裝試劑的穩(wěn)定性 按說(shuō)明書的保存方法儲(chǔ)藏，于不同時(shí)期取出一瓶復(fù)溶，測(cè)定試劑吸光度值、標(biāo)準(zhǔn)品含量、定值血清含量、線性范圍、酶促反應(yīng)時(shí)間曲線或化學(xué)反應(yīng)速度時(shí)間曲線及其他性能指標(biāo)，直到這些指標(biāo)變化超出規(guī)定值的10%以上的期限，為原包裝試劑的穩(wěn)定期。

(2)復(fù)溶后試劑的穩(wěn)定性 將復(fù)溶試劑分別放在4℃、25℃保存，逐日與新復(fù)溶試劑對(duì)比，觀察上述指標(biāo)，直到測(cè)定結(jié)果與新復(fù)溶試劑的差值>10%以上，這一期限為復(fù)溶后試劑的穩(wěn)定期。

(3)不同溫度下的保存期 將原包裝試劑盒置25℃、37℃、45℃、4℃保存，以出現(xiàn)說(shuō)明試劑變質(zhì)的指標(biāo)來(lái)確定在不同溫度下的保存期。

(二)選購(gòu)試劑盒的要求和注意事項(xiàng)

1.選購(gòu)試劑盒的一般要求

(1)所采用的測(cè)定方法特異性好，靈敏度、準(zhǔn)確度、精密度符合衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心、IFCC、WHO等推薦的方法性能。

(2)試劑盒的儲(chǔ)存期至少為1年。

(3)水溶性、低粘性、無(wú)腐蝕、無(wú)毒害、不爆炸、不易燃、不污染環(huán)境。

(4)所用標(biāo)準(zhǔn)品或標(biāo)準(zhǔn)參考物符合衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心、IFCC、WHO推薦的標(biāo)準(zhǔn)和要求。

2.選購(gòu)試劑盒的注意事項(xiàng)

(1)首先要仔細(xì)閱讀試劑盒的說(shuō)明書，對(duì)試劑盒選用方法有所了解，科學(xué)研究工作時(shí)應(yīng)選擇參考方法試劑盒，醫(yī)療預(yù)防工作應(yīng)選擇推薦的常規(guī)方法試劑盒，或選擇公認(rèn)的測(cè)定方法試劑盒。此外，對(duì)試劑盒的組成、方法性能指標(biāo)加以分析，是用于手工操作，還是用于自動(dòng)分析儀。屬于后者，其實(shí)驗(yàn)參數(shù)是否與本單位自動(dòng)分析儀的實(shí)驗(yàn)參數(shù)相符。

(2)有無(wú)衛(wèi)生部的批準(zhǔn)文號(hào)。凡已列入衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)體外診斷試劑審批管理范圍的試劑盒，沒有生產(chǎn)批準(zhǔn)文號(hào)的，不應(yīng)使用。對(duì)有生產(chǎn)批準(zhǔn)文號(hào)者，也需考察生產(chǎn)廠家的信譽(yù)。

(3)對(duì)試劑盒的包裝、理學(xué)性能、方法學(xué)性能指標(biāo)進(jìn)行考察和檢測(cè)，并經(jīng)實(shí)際應(yīng)用。符合說(shuō)明書規(guī)定及本室實(shí)驗(yàn)要求者方可選購(gòu)。

(4)根據(jù)本單位的日工作量、分析儀試劑用量、試劑復(fù)溶后4℃穩(wěn)定期等因素綜合分析，應(yīng)選購(gòu)合適包裝，近期出廠的產(chǎn)品。

(5)注意季節(jié)對(duì)試劑質(zhì)量的影響。一般在氣溫較低的季節(jié)購(gòu)買試劑，防止試劑盒在運(yùn)輸途中變質(zhì)。

(6)在確保試劑盒質(zhì)量前提下，應(yīng)選購(gòu)價(jià)格低的產(chǎn)品。

五、試劑盒的性能評(píng)價(jià)方法

1.說(shuō)明書審查 審查內(nèi)容包括：①試劑名稱;②用途;③測(cè)定原理和技術(shù)要求;④試劑盒內(nèi)的包裝內(nèi)容;⑤適用儀器;⑥標(biāo)本要求;⑦測(cè)定步驟及注意事項(xiàng);⑧貯存的條件及有效期;⑨性能特征，包括準(zhǔn)確度、精確度、特異性、受干擾的程度、線性范圍、參考范圍;⑩生產(chǎn)單位名稱、地址、郵編及電話。

2.理學(xué)檢驗(yàn)與評(píng)價(jià) 理學(xué)檢驗(yàn)的內(nèi)容有：①外包裝應(yīng)完整牢固，封口嚴(yán)密，標(biāo)簽清晰;②有詳細(xì)的用戶說(shuō)明書，衛(wèi)生部批準(zhǔn)的生產(chǎn)文號(hào)，生產(chǎn)日期，有效期和保存條件;③粉劑型應(yīng)均勻無(wú)凝塊，不粘附瓶壁;④液體型試劑應(yīng)無(wú)沉淀，無(wú)混濁，無(wú)滲漏;⑤復(fù)溶后或液體試劑的pH應(yīng)符合標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定。

3.性能指標(biāo)的檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)

(1)線性范圍的測(cè)定 試劑盒的線性范圍，既是衡量其質(zhì)量的重要指標(biāo)，也是保證正確使用和鑒定試劑盒的關(guān)鍵指標(biāo)之一。一旦線性范圍變窄即應(yīng)廢棄。造成線性范圍變窄的原因常見的有：①生產(chǎn)中組份投料量不足;②生產(chǎn)后組分穩(wěn)定性差;③運(yùn)輸和貯存不當(dāng)?shù)取?/p>

2.觀察時(shí)間反應(yīng)曲線

(1)終點(diǎn)法 ①試劑空白的吸光度是否符合規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)，否則會(huì)影響測(cè)定的精密度和準(zhǔn)確度;②試劑空白的時(shí)間反應(yīng)曲線應(yīng)平坦，且無(wú)明顯波動(dòng)，否則，說(shuō)明試劑本身不穩(wěn)定，會(huì)導(dǎo)致測(cè)定偏差;③反應(yīng)能否在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)達(dá)到平衡，達(dá)到平衡的時(shí)間應(yīng)在終點(diǎn)法讀取測(cè)定吸光度的時(shí)間之前。反應(yīng)速度慢的原因，常為試劑中酶量不足或酶質(zhì)量不好，或反應(yīng)條件不是最適條件;④反應(yīng)達(dá)到平衡后，吸光度最大并維持不變，這一期間為反應(yīng)平衡期，終點(diǎn)法測(cè)定應(yīng)在這一期間讀取吸光度。

(2)連續(xù)監(jiān)測(cè)法 ①試劑空白值是否符合規(guī)定，吸光度下降型的反應(yīng)，試劑空白吸光度應(yīng)在1.5左右，吸光度上升型的試劑空白吸光度越低越好，不符合說(shuō)明書中規(guī)定值者不宜使用;②試劑空白的時(shí)間反應(yīng)曲線應(yīng)平坦，吸光度變化(△A/min)應(yīng)≤0.001，若大于此值，表明試劑本身分解變化，會(huì)使測(cè)定結(jié)果產(chǎn)生誤差;③延遲期、線性反應(yīng)期與設(shè)定的實(shí)驗(yàn)參數(shù)是否相符，若不相符應(yīng)予修改;④觀察時(shí)間反應(yīng)曲線的斜率，通過定值血清，分析試劑盒的靈敏度。當(dāng)試劑盒中底物濃度不足，輔助酶或指示酶的酶量不足或質(zhì)量不好，反應(yīng)條件不是最適條件等情況時(shí)，時(shí)間反應(yīng)曲線斜率下降，靈敏度低，測(cè)定結(jié)果有嚴(yán)重比例誤差，這種試劑盒無(wú)法糾正，不能使用。

3.穩(wěn)定性試驗(yàn) 評(píng)估試劑盒的穩(wěn)定性應(yīng)包括原包裝和工作液在試劑盒指定條件下的穩(wěn)定性。試劑盒的穩(wěn)定性與貯存條件密切相關(guān)，工作液的穩(wěn)定性還和使用中污染與否有關(guān)，在評(píng)估時(shí)，須保持指定貯存條件并要嚴(yán)防污染。