1.提取
提取鞣質的中藥原料最好用新鮮原料,且宜立即浸提,也可以用冷凍或浸泡在丙酮中的方法貯存。原料的干燥宜在盡短的時間內完成,以避免鞣質在水分、日光、氧氣和酶的作用下變質。
提取將藥材粉碎,過篩,用95%乙醇冷浸或滲漉提取,提取液或滲漉液減壓濃縮成浸膏。
2.分離
(1)溶劑法:通常將含鞣質的水液先用乙醚等極性小的溶劑萃取,除去極性小的雜質,然后用乙酸乙酯提取,可得到較純的鞣質。亦可將鞣質粗品溶于少量乙醇和乙酸乙酯中,逐漸加入乙醚,鞣質可沉淀析出。
(2)沉淀法:向含鞣質的水液中分批加入明膠溶液,濾取沉淀,用丙酮回流,鞣質溶于丙酮,蛋白質不溶于丙酮而析出。
(3)柱色譜法:普遍采用的固定相是Diaion HP-20,Toyopearl HW-40,Sephadex LH-20及MCIGelC HP-20.以水-甲醇、水-乙醇、水-丙酮為流動相(洗脫劑)。
(4)高效液相色譜法:HPLC法對鞣質不僅具有良好的分離效果,而且還可以用于判斷鞣質分子的大小、各組分的純度及α、β-異構體等,具有簡便、快速、準確、實用性強等優點。
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