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免疫檢驗 抗血清純化技術

時間:2012-10-24 10:18來源:臨床醫(yī)學檢驗技術考試 作者:lengke 點擊:
  

純化的目的是盡量去除抗血清中與目的抗體不相關的成分,防止與特定抗原反應時起干擾作用。最常見的純化方式是提取特異性IgG或單價特異性抗血清。

一、特異性IgG抗血清制備

首先用硫酸銨或硫酸鈉鹽析法粗提丙種球蛋白,再進一步純化,常用的方法有:

1.離子交換層析法:離子交換劑有DEAE纖維素和QAE纖維素。

2.凝膠過濾:通過多孔凝膠介質達到分離目的。

3.親和層析法:采用純化抗原或粗提抗原交聯的sepharose 4B的層析柱來制備。

4.酶解法:片段用胃蛋白酶水解制備。

二、單價特異性抗血清制備

主要通過親和層析法(交叉雜抗原與瓊脂糖珠4B交聯制成層析柱)和吸附法(用雙功能試劑與抗原交聯,制成固相吸附劑)除去雜抗體。

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