瑞氏染色法是最經(jīng)典、最常用染色法,尤其對(duì)于細(xì)胞質(zhì)成分、中性顆粒等可獲得很好的染色效果,但對(duì)細(xì)胞核的著色能力略差。姬姆薩染液對(duì)細(xì)胞核、寄生蟲(chóng)(如瘧原蟲(chóng)等)著色較好,結(jié)構(gòu)更清晰,但對(duì)細(xì)胞質(zhì)成分的著色能力略差。采用瑞氏一姬姆薩復(fù)合染液可使細(xì)胞胞質(zhì)、顆粒、胞核等均獲得滿意的染色效果。
瑞氏染料的質(zhì)量規(guī)格用吸光度比值(rA)來(lái)評(píng)價(jià),rA測(cè)定方法:取瑞氏染液15~25μl,加甲醇10ml稀釋,混勻,以甲醇為空白管,分別在波長(zhǎng)650nm(美藍(lán)吸收峰波長(zhǎng))、525nm(伊紅吸收峰波長(zhǎng))測(cè)定吸光度(rA=A650/A525)。新配制染料rA接近2,隨美藍(lán)逐漸氧化為天青B(其吸收峰為650nm,吸光度約為美藍(lán)一半),rA也下降,降到1.3±0.1時(shí),染料即可使用。新鮮配制的染料偏堿,須在室溫或是37℃下貯存一定時(shí)間,待美藍(lán)逐漸變?yōu)樘烨郆,貯存時(shí)間愈久,染色效果愈好。在貯存過(guò)程中,必須加塞,以防甲醇揮發(fā)(如加甘油)和氧化成甲酸,所用甲醇須為AR級(jí),若其中含過(guò)多丙酮,會(huì)使染色偏酸,白細(xì)胞著色不良。