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免疫檢驗 人絨毛膜促性腺激素檢查方法

時間:2012-01-13 14:27來源:臨床醫學檢驗技術考試 作者:sunhong13 點擊:
  

  成熟女性因受精的卵子移動到子宮腔內著床后,形成胚胎,在發育成長為胎兒過程中,胎盤合體滋養層細胞產生大量的人絨毛膜促性腺激素(humanchorionicgonadotropin,HCG),可通過孕婦血液循環而排泄到尿中。當妊娠1-2.5周時,血清和尿中的HCG水平即可迅速升高,第8孕周達到高峰,至孕期第4個月始降至中等水平,并一直維持到妊娠末期。

  正常妊娠婦女血清中HCG平均值。HCG是由兩個非共價鍵相連的肽鏈組成的糖蛋白激素。其單個亞基不具有生物活性,當連接成完整化合物時始具活性,分子量約為4.7萬。其主要功能就是刺激黃體,有利于雌激素和黃體酮持續分泌,以促進了宮蛻膜的形成,使胎盤生長成熟。HCG-α亞單位的被崤帕杏牖鋪逕ぜに兀↙H)α亞單位相似,故用完整的抗HCG分子的抗體測定HCG時與LH間有免疫交叉反應。但它們的β亞單位各不相同。因此為避免交叉反應,目前均采用高將近的抗β-HCG單克隆抗體進持特異的HCG檢查,近年來還有報道采用抗β-HCG羧基末端肽單克隆抗體以進一步提高檢測的敏感性和特異性。

  膠乳凝集抑制試驗和血凝抑制試驗。從1960年開始,國外的Wide及Gemzell,開始采用膠乳凝集抑制的試驗方法(latexagglutinationinhibitiontest,LAIT)技術測定尿中HCG,即將尿液與抗HCG血清作用后,加入已吸附抗原的膠乳,如尿中含HCG較多,則先與抗HCG結合,不再有多余的抗HCG與膠乳產生凝集而仍呈均勻的乳膠狀,是為陽性。相反,不含HCG尿不與抗血清作用,當加入吸附抗原的膠乳之后,抗血清可與膠乳抗原反應,出現明顯的“特”特性凝集顆粒,即為陰性。

  之外,也可利用血細胞的血凝抑制試驗(hemoagglutinationinhibitiontest,HAIT),其原理與膠乳法一致只是載體由膠乳改成羊紅細胞。這兩種試驗方便簡便,靈敏度為100-500Mu/ML,適合大批標本檢查,但因特異性差,不能定量,已逐漸被單克隆抗體法所取代。

  放射免疫試驗(RIA)。利用放射標記的HCG與被檢測尿中的HCG競爭性地結合抗-HCG抗體,當被檢尿中HCG增加時,結合物的放射性減低,與不同含量標準品對比可測尿中HCG的含量。使定量檢測成為可能。由于RIA需一定設備,試驗手續繁雜,且有核素污染問題,不適用于臨床常規應用。

  酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。該方法目前已廣泛應用于臨床,其基本原理是運用夾心免疫酶分析技術。即采用HCG單克隆抗體包被于固相表面,樣品中的HCG都將與支持物表面的抗體相結合。與樣品一孵育后,沖洗耳恭聽表面,然后加入特異性酶標抗β-HCG亞基的單克隆抗體,最后加入酶作用的基質,即產生顏色。該法可目測,靈感度為20-50Mu/ml,采用抗β-HCG單克隆抗體二點酶免疫法進行定量,靈敏度可達2-10mU/ml。目前免疫酶法進一步發展為更簡便、適于病人自檢的一步法,即免疫酶滲透試驗。

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