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臨床檢驗基礎 交叉配血法

時間:2010-10-21 10:47來源:臨床醫學檢驗技術考試 作者:lengke 點擊:
  

  交叉配血法最重要的是ABO血型配合。必須在ABO血型相同,且交叉配血無凝集時才能輸血。

  1.目的:檢查受血者與供血者是否存在血型抗原與抗體不合的情況。

  2.原則:主側加受血者血清與供血者紅細胞;次側加受血者紅細胞與供血者血清,觀察兩者是否出現凝集。

  3.方法

  (1)鹽水配血法:簡便快速。主要缺點是只能檢出不相配合的完全抗體,而不能檢出不完全抗體。

  (2)抗球蛋白法配血法:又稱Coombs試驗。是最可靠的確定不完全抗體的方法,但操作繁瑣。抗球蛋白法配血法是最早用于檢查不完全抗體的方法。

  直接抗球蛋白法可檢查受檢者紅細胞是否已被不完全抗體致敏;間接抗球蛋白法可用于鑒定Rh血型及血清中是否存在不完全抗體。本法雖較靈敏,但也有一定限度,且操作復雜,不利于急診檢查和血庫的大批量工作。

  試劑:抗球蛋白試劑盒:包括抗廣譜、抗C3、抗IgG3種試劑。陽性對照:IgG型抗D致敏5%RhD陽性紅細胞生理鹽水懸液。陰性對照:正常人5%紅細胞生理鹽水懸液。

  注意事項:①標本采集后應立即進行試驗,延遲試驗或中途停止可使抗體從細胞上丟失。②抗人球蛋白血清應按說明書最適稀釋度使用,否則可產生前帶或后帶現象而誤為陰性結果。③陰性對照凝集:可能是抗人球蛋白血清處理不當,仍有殘存的種屬抗體,或被細菌污染,應更換血清重做試驗。核實陰性結果方法:在該試管中加1滴IgG致敏紅細胞,如結果為陽性,則表示試管內的抗球蛋白血清未被消耗,陰性結果可靠。④陽性對照不凝集:可能是抗人球蛋白血清或用于致敏紅細胞的不完全抗D血清失效,或紅細胞未洗凈帶人球蛋白所致,應更換血清或洗凈紅細胞后重做。⑤如需了解體內致敏紅細胞的免疫球蛋白的類型,則可分別以抗IgG、抗IgM或抗C3單價抗球蛋白血清進行試驗。

  (3)聚凝胺法配血法:可以檢出IgM與IgG兩種性質的抗體,能發現可引起溶血性輸血反應的幾乎所有規則與不規則抗體,故本法已逐漸推廣使用。配血原理:聚凝膠分子是帶有高價陽離子多聚季鍍鹽,溶解后帶有很多正電荷可以中和紅細胞表面負電荷,有利于紅細胞凝集,低離子強度溶液也能減低紅細胞的Zeta電位,可進一步增加抗原抗體間的吸引力。當血清中存在IgM或IgG類血型抗體時,與紅細胞發生緊密結合,此時加入枸櫞酸鹽解聚液以消除聚凝膠的正電荷,使IgM或IgG類血型抗體與紅細胞產生凝集不會散開。如血清中不存在IgM或IgG類血型抗體,加入解聚液可使非特異性凝集消失。

  (4)凝膠配血法:又稱微管(板)凝膠抗球蛋白試驗,此法在凝膠中進行,保持了傳統抗球蛋白試驗的準確、具有簡便、可靠的特點,全自動血型分析儀進行交叉配血,也是利用凝膠配血。

  其他可檢出不完全抗體的方法有蛋白酶法、膠體介質法等。

  卡式配血/血型鑒定檢測法已成為國際安全輸血檢查的推薦方法。

  4.質量控制

  (1)血液標本:交叉配血的血液標本,受血者標本應為新鮮血,供血者標本應為血袋兩端剛剪下小管中的血液。

  (2)選用方法:用試管法做交叉配血。

  (3)溶血現象:配血管出現溶血現象,為配血不合。

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