在小口徑試管（內徑2～3mm）內，先加入含已知抗體的血清，然后沿管壁徐徐加入待檢抗原，使之重疊于血清上面（勿使兩者混合）。靜置于室溫數分鐘后，兩層液面交界處出現乳白色沉淀環，為陽性反應。

　　此法比較簡便、敏感，可用于檢查未知抗原，如檢測炭疽桿菌的耐熱多糖類抗（ASCOLI氏試驗）、血跡來源等。