在小口徑試管（內(nèi)徑2～3mm）內(nèi)，先加入含已知抗體的血清，然后沿管壁徐徐加入待檢抗原，使之重疊于血清上面（勿使兩者混合）。靜置于室溫數(shù)分鐘后，兩層液面交界處出現(xiàn)乳白色沉淀環(huán)，為陽性反應(yīng)。

　　此法比較簡便、敏感，可用于檢查未知抗原，如檢測炭疽桿菌的耐熱多糖類抗（ASCOLI氏試驗）、血跡來源等。