可溶性抗原和抗體在半固體瓊脂內(nèi)擴(kuò)散，進(jìn)行沉淀反應(yīng)，稱瓊脂擴(kuò)散反應(yīng)。瓊脂擴(kuò)散可分為單向瓊脂擴(kuò)散和雙向瓊脂擴(kuò)散兩種類型。

　　1.單向瓊脂擴(kuò)散——將一定濃度的抗體與半固體瓊脂混合，傾注于平皿或玻片上。凝固后，在瓊脂層打孔，再將抗原加入孔中，使其向四周擴(kuò)散，一定時間后在比例適當(dāng)處形成肉眼可見的環(huán)狀沉淀線。

　　該反應(yīng)也可在試管內(nèi)進(jìn)行。

　　2.雙向瓊脂擴(kuò)散——將半固體瓊脂傾注于平皿或玻片上。待凝固后，在瓊脂上按一定距離打數(shù)個孔，然后將抗原與抗體分別注入小孔內(nèi)，兩者互相呈放射狀擴(kuò)散。一定時間后，相應(yīng)的抗原抗體在濃度最適當(dāng)?shù)牡胤匠霈F(xiàn)白色沉淀線。

　　該反應(yīng)也可在試管中進(jìn)行。但要注意的是，半固體瓊脂要放在抗體與抗原之間。

　　瓊脂擴(kuò)散反應(yīng)和電泳技術(shù)結(jié)合起來，進(jìn)一步發(fā)展為免疫電泳技術(shù)。免疫電泳技術(shù)由于具體操作的不同，又可分成許多種方法，如對流免疫電泳、“火箭”免疫電泳、抗原一抗體交叉免疫電泳等。

　　瓊脂擴(kuò)散反應(yīng)在實(shí)踐中應(yīng)用很廣，主要用于抗原抗體成分的研究、生物制品的純度分析、某些疾病的臨床診斷。