三萜類化合物色譜分離法是中藥士/初級中藥師/主管中藥師考試大綱考點內(nèi)容，衛(wèi)生資格考試吧整理中藥學(xué)資格考試輔導(dǎo)資料、考點內(nèi)容，供廣大中藥學(xué)職稱考試考生參考學(xué)習(xí)：

　　色譜法是目前分離三萜類化合物最常用的方法，通常采用多種色譜法相組合的方法。

　　①吸附柱色譜法；②分配柱色譜法；③高效液相色譜法；④大孔樹脂柱色譜；⑤凝膠色譜法。

　　（1）吸附柱色譜法：

　　①常用方法，可用于分離各類三萜化合物。

　　②依據(jù)所用的吸附劑性質(zhì)的不同，分為正相吸附柱色譜和反相吸附柱色譜。

　　③正相吸附柱色譜的吸附劑常用硅膠。

　　④反相柱色譜通常以鍵合相硅膠Rp-18、Rp-8或Rp-2等為填充劑。

　　（2）分配柱色譜法：多用于分離皂苷，常用硅膠等作為支持劑，固定相為3%草酸水溶液等，流動相為含水的混合有機(jī)溶劑：如氯仿-甲醇-水，正丁醇-水等。

　　（3）高效液相色譜法：是目前分離皂苷類化合物最常用的方法，分離效能較高。用于皂苷的分離制備一般采用反相色譜柱，以甲醇-水、乙腈-水等系統(tǒng)為洗脫劑。

　　（4）大孔樹脂柱色譜：適用于皂苷的精制和初步分離。

　　操作：將含有皂苷的水溶液通過大孔樹脂柱后，先用水洗滌除去糖和其他水溶性雜質(zhì)，然后再用濃度由低到高的甲醇或乙醇依次進(jìn)行梯度洗脫，極性大的皂苷可被l0%～30%的醇洗脫下來，極性小的皂苷則被50%以上的醇洗脫下來。

　　（5）凝膠色譜法：分子篩的原理來分離分子量不同的化合物，在用不同濃度的甲醇、乙醇或水等溶劑洗脫時，各成分按分子量遞減順序依次被洗脫下來。即分子量大的皂苷先被洗脫下來，分子量小的皂苷后被洗脫下來。應(yīng)用較多的是在有機(jī)相中使用的Sephadex LH-20.