二級試劑的作用是信號擴增，選擇是根據一抗的標記形式而決定的，對于無標記的一抗，可以選擇對應一抗來源種屬的標記二抗，或者更便宜的標記蛋白A（來自金黃葡萄球菌Protein A可以高度親和來自人，兔，豚鼠的IgG，但對大鼠、山羊和雞的IgG親和力弱）。不過，二抗是更可靠的選擇——除了要選擇對應一抗的來源種屬，也要根據你準備采用的檢測方法選擇合適的標記。